Approche intégrée X-Clarity et vibratome pour caractériser l’interaction hôte/parasite : Biomphalaria / Schistosome – David Duval (IHPE – Perpignan)

L’étude histologique de l’interaction entre le parasite Schistosoma mansoni et son hôte intermédiaire le mollusque Biomphalaria glabrata repose classiquement sur des coupes sériées en paraffine. Cependant, il est impossible de savoir a priori si un mollusque est infecté et, sur les lames non colorées, le parasite n’est pas identifiable dans les tissus. Son repérage nécessite donc l’examen de nombreuses coupes colorées successives et, compte tenu de sa taille (≈110 µm × 27 µm) et de l’épaisseur des coupes histologiques, il est le plus souvent observé de manière fragmentaire.
L’utilisation de parasites marqués par un traceur fluorescent (CellTracker™ CMFDA) permet de visualiser directement le parasite dans les tissus du mollusque, mais les procédures classiques de fixation et d’inclusion en paraffine ne préservent pas cette fluorescence. Afin de conserver ce signal, des coupes épaisses ont été réalisées au vibratome, augmentant la probabilité d’observer des parasites entiers et permettant la réalisation de marquages fluorescents. L’imagerie confocale permet ensuite une visualisation tridimensionnelle du parasite dans les tissus de l’hôte, bien que l’analyse reste limitée au volume correspondant à l’épaisseur de coupe.
Pour dépasser cette limitation, une clarification tissulaire basée sur la technologie X-Clarity a été mise en œuvre, permettant l’observation du mollusque dans son intégralité et la détection des parasites fluorescents dans le mollusque. La localisation de protéines impliquées dans la réponse immunitaire, telles que la biomphalysine, associée à des structures glandulaires tubulaires jusqu’alors non décrites, a également été rendue possible.
Cette stratégie intégrée offre une nouvelle approche histologique pour étudier spatialement l’interaction et les mécanismes immunitaires impliqués dans la compatibilité entre Biomphalaria et Schistosoma.