Etude des interactions mitochondries-réticulum sarcoplasmique dans le muscle squelettique de truite par microscopie électronique à balayage sur coupes sériées – Angélina Campagna (DMEM – Montpellier)

Etude des interactions mitochondries-réticulum sarcoplasmique dans le muscle squelettique de truite par microscopie électronique à balayage par coupes sériées. Angelina Campagna1, Lucien Daunas2, Laurence Berry2, Jean-Charles Gabillard3, Vincent Ollendorff1 et Béatrice Chabi1. 1DMEM, Univ Montpellier, INRAE, Montpellier, France 2EM4BIO, MRI, BIOCAMPUS, Univ Montpellier, CNRS, INSERM, Montpellier, France 3 Laboratoire de Physiologie et Génomique des Poissons, INRAE, Campus de Beaulieu, Rennes, France Une accumulation efficace des protéines musculaires est essentielle à la croissance et aux qualités nutritionnelles recherchées dans la chair de poisson. Dans les cellules musculaires, cette synthèse des protéines nécessite une très grande quantité d’énergie qui est fournie par la conversion des nutriments et la consommation d’oxygène au sein des mitochondries. Des travaux récents notamment chez la souris, indiquent que la production d’énergie par ces mitochondries doit être finement couplée à la synthèse des protéines pour éviter une perte de croissance de la masse musculaire. Ce couplage serait notamment régulé par des interactions membranaires appelées MAMs (mitochondria-associated membranes), entre mitochondries et réticulum endoplasmique (siège de la synthèse protéique). Dans ce projet, nous cherchons à évaluer le nombre et l’étendue de ces interactions afin de déterminer leur importance dans les mécanismes de croissance de la masse musculaire de la truite arc-en-ciel. La microscopie électronique à transmission (MET) 2D est à ce jour la méthode de référence pour visualiser les interactions inter-organites mais elle ne permet d’accéder aux mesures de surface et de volume qui sont importantes pour évaluer les MAMs. Pour accéder à ces paramètres, des échantillons de muscles de truite ont été imagés par microscopie électronique à balayage en coupes sériées (SBF-SEM). Une segmentation automatisée des différents organites a été ensuite réalisée sur chacune des coupes à l’aide d’un logiciel d’analyse d’image par réseau de neurones nous permettant d’obtenir la structure 3D du réseau mitochondrial et du réticulum endoplasmique dans le muscle. Les mesures de volume, surface et distance d’interactions entre mitochondries et réticulum endoplasmique seront ensuite réalisées afin de caractériser et de quantifier la diversité des MAMs dans des échantillons de muscles de truite d’un groupe contrôle comparé à des échantillons de muscles de truite soumises à un régime nutritionnel modulant la croissance musculaire.